2024-10-22
Kozmetiklerde sıvı kromatografi ile 6-metilkumarinin belirlenmesi
1.1 Enstrüman konfigürasyonu
Tablo 1 Sıvı Kromatografi Yapılandırma Listesi
- Hayır, hayır. | Modül | Qty |
1 | PB3210 İkili pompa | 1 |
2 | CT3400 Sütun Fırını | 1 |
3 | AS3210 Otomatik Örneklemeci | 1 |
4 | UV3210 UV dedektörü | 1 |
5 | NovaChrom SC18 4.6*250mm, 5μm | 1 |
6 | SmartLab Çalışma İstasyonu | 1 |
1.2 Deney Yöntemi
1.2.1 Rejanlar
Tablo 2 Rejanlar Listesi
- Hayır, hayır. | Rejanlar | Saflık |
1 | Metanol | Hromatografik Derece |
2 | 6-metilkumarin | % 99 |
3 | Amonyum dihidrojen fosfat | AR |
4 | Fosforik asit | GR |
1.2.1.1 6-Metilkumarin standart stok çözeltisi (1000mg/L): Uygun miktarda 6-Metilkumarin standart alınır.metanol ile çözülmüş ve hacmi sabitlenmiş ve 1000mg/L konsantrasyonda standart stok çözeltisine hazırlanmıştır..
1.2.1.2 6-Metilkumarin standart çalışma çözeltisi:Pipette uygun miktarda 6-metilkumarin standart stok çözeltisi ve metanol ile seyreltilmiş, 0'luk konsantrasyonlarda bir dizi çalışma eğrisi hazırlanmıştır..1mg/L, 0.5mg/L, 1.0mg/L, 3.0mg/L, 5.0mg/L ve 10.0mg/L.
1.2.1.3 Sodyum dihidrojen fosfat tampon çözeltisi: 3.12g sodyum dihidrojen fosfat alın, çözülmek için su ekleyin ve 1000mL'ye kadar seyreltin ve fosforik asidin pH'sını 3'e ayarlayın.5.
1.2.2 Hromatografi koşulları
Tablo 3 Hromatografi koşulları
Kromatografi sütunu | NovaChrom SC18 4.6*250mm 5μm | ||
Hareketli Aşama | A: Metanol,B:Sodyum dihidrojen fosfat tampon çözeltisi | ||
Akış Hızı | 1 ml/dakikada | ||
Sütun sıcaklığı | 35°C | Dalga boyu | 275nm |
Enjeksiyon hacmi | 10 μl |
Tablo 4 Eklüsiyon Programı
Zaman (dakika) | Mobil Aşama A | Hareketli B aşaması |
0 | 55 | 45 |
11 | 55 | 45 |
12 | 90 | 10 |
40 | 90 | 10 |
41 | 55 | 45 |
50 | 55 | 45 |
1.2.3 Örnek ön işleme
Örneğin 1g'ini (0,001g'e kadar doğru) 10mL'lik bir hacim kolbede alın, 5mL metanol ekleyin, örneği ekstraksiyon çözeltisiyle tamamen karıştırmak için girdaplandırın ve sallayın, 20 dakikalığına ultrasonik ekstraksiyon yapın,oda sıcaklığına soğutulur ve daha sonra metanol ile hacmi 10mL'ye sabitler, karıştırılır ve sonra santrifüj tüplerine aktarılır, 5 dakikalığına 5000 r/dakikada santrifüj edilir.ve 0'dan filtrelenen süpernatant.45μm organik zar ve sonra test edilmelidir.
2Deneyin sonucu.
2.1 Sistem Uygunluğu
Şekil 1 Standart Kromatogramı 10mg/L
Tablo 5 10mg/L standartları için test verileri
Bileşikler | Saklama süresi | Zirve Bölgesi | Teorik plak numarası |
6-metilkumarin | 11.168 | 574.285 | 15854 |
Not:Kromatogram ve veriler, 6-metilkumarinin iyi bir zirve şekline sahip olduğunu ve hedef zirvenin etrafında başka zirveler olmadığını ve teorik plaka sayısının yüksek olduğunu göstermektedir.deneysel gereksinimleri karşılayan.
2.2 Standart eğri
Şekil 2 Standart eğrenin test sonucu
Not: Kromatogram, 6-metilkumarin eğrisinin korelasyon katsayısının R değerinin 0'dan yüksek olduğunu göstermektedir.9999, deneysel gereksinimleri karşılar.
2.3 Tekrarlanabilirlik
Şekil 3 Tekrarlanabilirlik Kromatogramı 3mg/L 6 Enjeksiyon Standartları
Tablo 6 Tekrarlanabilirlik Verileri 3mg/L 6 Enjeksiyon StandartlarıTablo 6 Tekrarlanabilirlik Verileri 3mg/L 6 Enjeksiyon Standartlarıs
6-metilkumarin |
- Hayır, hayır. | Saklama süresi | Zirve Bölgesi |
1 | 11.159 | 177.710 | |
2 | 11.161 | 176.711 | |
3 | 11.142 | 177.128 | |
4 | 11.152 | 176.985 | |
5 | 11.150 | 177.469 | |
6 | 11.149 | 177.629 | |
RSD (%) | 0.061 | 0.222 |
Not: Yukarıdaki tablodaki verilere göre, 6-metilkumarinin retans zamanı tekrarlanmasının RSD'si% 0,061 ve zirve alanı tekrarlanmasının RSD'si% 0,222'dir.Tekrarlanabilirlik iyi ve deneysel gereksinimleri karşılar.
2.4 Bulma sınırı
Şekil 4 0.02mg/L Standartlardaki Test Kromatogramı
Tablo 7 0.02mg/L Standartlar için Test Verileri
Bileşikler | Saklama süresi | Zirve Bölgesi | SNR |
6-metilkumarin | 11.153 | 1.208 | 19.296 |
Not: Yukarıdaki verilere göre, algılama sınırı olarak sinyal-gürültü oranının 3 katı hesaplanır ve 6-metilkumarin'in algılama sınırı 0,004mg/L olduğu bulunmuştur.Deneysel gereksinimleri karşılıyor..
2.5 Kozmetik örneğinin test sonucu
Şekil 5 Kozmetik numunenin test kromatogramı
Not: Kozmetik örneğinde 6-metilkumarin tespit edilmemiştir.
2.6 Dikkat
Yüksek hızlı santrifüj kullanırken, tüplerin simetrik olarak yerleştirilmesine ve tüplerin karşıt taraflardaki toplam kütlesinin aynı olmasına dikkat edin.
3Sonuç.
Bu makalede sunulan analiz yöntemi, 6 metil kumarin tespitinde Kozmetikler için Güvenlik ve Teknik Standartlar ile,Wayeal yüksek performanslı sıvı kromatografi LC3200 serisi ile UV dedektörü kullanarakDeneyin sonucu, sistem uyumluluk testinde 6-metilkumarin'in zirve şeklinin iyi olduğunu ve hedef zirvenin etrafında başka zirvelerin olmadığını göstermektedir.Ve teorik plak numarası yüksek.Deneysel gereksinimleri karşılayan eğri korelasyon katsayısı R değeri 0'dan üstündür.99996-metilkumarinin retans zamanının tekrar edilebilirliğinin RSD'si% 0.061, zirve alanının tekrar edilebilirliğinin RSD'si% 0.222'dir, bu da iyi bir tekrarlanabilirliği gösterir..004mg/L. Yukarıdaki tüm test sonuçları standart yöntemdeki cihazın gereksinimlerini karşılar.
Sorgularınızı doğrudan bize gönderin.