Polietilen glikolün jel permeasyon kromatografisi ile belirlenmesi
1. Giriş
Amaç: Yüksek performanslı jel nüfuz kromatografisi (GPC) yöntemi ile polietilen glikoli (PEG) moleküler ağırlığının ve dağılımının belirlenmesi.
Yöntem:
Xtimate SEC-120, 5 μm, 7.8x300 mm gel nüfuz kromatografi sütunu
Farklı kırılma endeksi dedektörü (RID)
Hareketli aşama: ultra saf su
Akış hızı: 1,0 ml/dakika
Sütun sıcaklığı: 35 °C;
Enjeksiyon hacmi: 10μl.
Kalibrasyon eğreleri belirlenir ve her numunenin moleküler ağırlığı ve dağılım sonuçları GPC yazılımı ile hesaplanır.
Sonuç: PEG'in doğrusallığı moleküler ağırlığı 400-20000 aralığında olduğunda iyidir. Deneyin yeniden üretilebilirliği iyidir, 6 ardışık PEG6000 enjeksiyonu ile,tutma zamanının RSD değeri 0'dur..105% ve zirve alanının RSD değeri 0.335%'dir.
Sonuç: Yüksek performanslı jel permeasyon kromatografisi (GPC), PEG'in moleküler ağırlığını ve dağılımını belirlemek için güvenilir bir yöntemdir.polimer bileşiklerinin polidispersite özelliğini değerlendirmek için kullanıldığında doğru ve yüksek yeniden üretilebilirlik avantajlarına sahiptir.
Anahtar kelimeler: HPLC, GPC, RID, Polimer, Polietilen Glikol
2Deney yöntemi.
2.1 Enstrüman konfigürasyonu
Tablo 1 Yüksek Performanslı Sıvı Kromatografın Yapılandırma Listesi
| - Hayır. |
Modüler |
Qty |
| 1 |
Yüksek performanslı sıvı kromatografi LC3200 Serisi |
1 |
| 2 |
PB3200 İkili Pompa |
1 |
| 3 |
RID3300 |
1 |
| 4 |
CT3200 Sütun Fırını |
1 |
| 5 |
AS3200 Otomatik Örneklemeci |
1 |
2.2 Sınav koşulları
Kromatografi Sütunu: Xtimate SEC-120,5μm,7.8x300mm
Sütun sıcaklığı: 35°C
Detektör: RID
Akış Hızı: 1.0mL/min
Hareketli Aşama: Su
Enjeksiyon hacmi: 10μL
2.3 Araç/Reaktörler ve Tüketim Malzemeleri
Rejanlar:
Ultra saf su
Standart: PEG400; PEG2000; PEG6000; PEG10000; PEG20000
Yardımcı ekipman
Analitik Denge
Solvent Ekstraksiyon Birimi
Ultrasonik Temizleyici
Deney Malzemeleri
Filtre zarı: su filtresi zarı 0.45μm
2.4 PEG standardının hazırlanması
PEG400, PEG2000, PEG6000, PEG10000 ve PEG20000 standartlarının her biri için 0,20g pipet, çözülmesi için 10mL su ekle, iyice karıştır ve test edilecek 20mg/mL örneklerin konsantrasyonunu hazırla.
3Sonuç ve Tartışma
3.1 Farklı Moleküler Ağırlık Standartları
Şekil 1 PEG400 kromatogramı
Tablo 1 PEG400 kromatografik parametreleri
| - Hayır. |
Bileşikler |
Saklama süresi |
Zirve Bölgesi |
Teryal plakası numarası |
İzleyen Faktör |
| 1 |
PEG400 |
10.315 |
501.732 |
2346 |
1.185 |
Şekil 2 PEG2000 kromatogramı
Tablo 2 PEG2000'nin kromatografik parametreleri
| - Hayır. |
Bileşikler |
Saklama süresi |
Zirve Bölgesi |
Teorik plak numarası |
İzleyen Faktör |
| 1 |
PEG2000 |
8.659 |
499.892 |
1926 |
1.230 |
Şekil 3 PEG6000 kromatogramı
Tablo 3 PEG6000 kromatografik parametreleri
| - Hayır. |
Bileşikler |
Saklama süresi |
Zirve Bölgesi |
Teorik plak numarası |
İzleyen Faktör |
| 1 |
PEG6000 |
7.215 |
499.482 |
|
1.171 |
Şekil 4 PEG10000 kromatogramı
Tablo 4 PEG10000 kromatografik parametreleri
| - Hayır. |
Bileşikler |
Saklama süresi |
Zirve Bölgesi |
Teorik plak numarası |
İzleyen Faktör |
| 1 |
PEG10000 |
6.612 |
483.657 |
2550 |
1.265 |
Şekil 5 PEG20000 kromatogramı
Tablo 5 PEG20000 kromatografik parametreleri
| - Hayır. |
Bileşikler |
Saklama süresi |
Zirve Bölgesi |
Teorik plak numarası |
İzleyen Faktör |
| 1 |
PEG20000 |
6.081 |
497.803 |
1103 |
1.799 |
Şekil 6 Farklı Moleküler Ağırlıklarda Çakışan Kromatogramlar
Not: Yukarıdaki veriler, PEG20000'ün tutma süresinin 6.081 dakika, PEG400'ün ise 10.315 dakika olduğunu göstermektedir, daha büyük moleküller önce elüte edilir ve daha küçük moleküller sonra elüte edilir.
3.2 Tekrarlanabilirlik
Şekil 7 PEG6000'in Tekrarlanabilirlik Çaprazlığı Kromatogramları (n=6)
Tablo 7 PEG6000'in Tekrarlanabilirlik Hromatografik Parametreleri (n=6)
| - Hayır. |
Örnekler |
Saklama süresi |
Zirve Bölgesi |
| 1 |
6000 |
7.233 |
498.821 |
| 2 |
6000 |
7.234 |
503.367 |
| 3 |
6000 |
7.225 |
499.891 |
| 4 |
6000 |
7.221 |
499.560 |
| 5 |
6000 |
7.219 |
501.374 |
| 6 |
6000 |
7.215 |
499.482 |
| Ortalama |
- |
7.225 |
500.416 |
| RSD (%) |
- |
0.105 |
0.335 |
Not: Tekrarlanabilirlik iyidir. PEG6000' in 6 enjeksiyonu için retans zamanının RSD' si % 0. 105 ve zirve alanının RSD' si % 0. 335' dir.
3.3 Standart eğriler
Şekil 8 Standart Eğimler Farklı Moleküler Ağırlıklarda Kromatogramlar
Tablo 8 Standart Eğimler Farklı Moleküler Ağırlıkların Hromatografik Parametreleri
Not: Her numunenin moleküler ağırlığı ve dağılım sonuçları GPC yazılımı ile hesaplanır.000, ve doğrusal korelasyon katsayısı 0.999.
4Sonuç.
Bu polietilen glikol (PEG) testi, diferansiyel kırılma indeksi dedektörü olan LC3200 serisi yüksek performanslı sıvı kromatograf kullanılarak jel kromatografisi ile yapılır.PEG20000 tutma süresi 6.081 dakika, ve PEG400 10.315 dakikadır, daha büyük moleküller önce elüte edilir ve daha küçük moleküller daha sonra elüte edilir. Tekrarlanabilirlik iyidir. Tutma süresinin RSD'si 0.105% ve zirve alanının RSD'si 0PEG6000'in 6 enjeksiyonu için %335. PEG moleküler ağırlığının doğrusallığı 400 ila 20 arasında iyi.000, ve doğrusal korelasyon katsayısı 0.9999Yüksek performanslı gel permeasyon kromatografisi (GPC), PEG'in moleküler ağırlığını ve dağılımını belirlemek için güvenilir bir yöntemdir.Polimer bileşiklerinin polidispersite özelliğini değerlendirmek için kullanıldığında doğru ve yeniden üretilebilir sonuçların avantajlarına sahip.
Not: Örnek oda sıcaklığında 12 saatten fazla bırakılmalı ve hafifçe karıştırılmalı, ultra ses kullanmamalı veya çözülmeyi hızlandırmak için güçlü bir şekilde salınmamalıdır.
Mesajınız 20-3.000 karakter arasında olmalıdır!
