İçeceklerde HPLC Kafein Analizi: Wanyi LC3500 DAD Yöntemi GB 5009.139-2014'e Göre Doğrulandı

Kafein, kahve çekirdeklerinde, çay yapraklarında ve kakaoda bulunan doğal olarak bulunan bir metilksantin alkaloididir.ve karbonatlı içeceklerde en yaygın kullanılan fonksiyonel katkı maddelerinden ve karakteristik lezzet bileşiklerinden biridir., enerji içecekleri, çay içecekleri ve hazır kahve. ılımlı alım uyanıklığı arttırır ve yorgunluğu hafifletir, ancak aşırı veya uzun süreli tüketim kalp atışlarını tetikleyebilir.uykusuzluk ve sinirsel heyecan, ve hamile kadınlar, çocuklar ve kardiyovasküler rahatsızlıkları olan kişiler gibi hassas gruplar çok daha düşük dozlara tolerans gösterir.Bu nedenle, ulusal gıda güvenliği standartları içecekler için açık kafein sınırları belirler..

Çin'de, içecek matrislerinde kafein miktarının belirlenmesi için yasal temel GB 5009.139-2014, içeceklerde kafeinin belirlenmesi için Ulusal Gıda Güvenliği Standartıdır.Yüksek performanslı sıvı kromatografi (HPLC), bileşik içecekler gibi karmaşık matrisler için tercih edilen teknik haline geldi, süt içeren içecekler ve bitkisel işlevsel içecekler, mükemmel ayrımı, matris müdahalelerine karşı güçlü direnç ve yüksek hassaslık ölçümü sayesinde.

Bir içecek üreticisi, çok farklı iki ürün hattında kafein seviyelerini doğrulamalıydı: karbonatlı kola tipinde bir içecek ve bir süt çayı ürünü.İki matrisin farklı hazırlama stratejilerine ihtiyacı var.: karbonatlı numuneler gazdan arındırılmalı ve temizlenmeli, süt içeren ürünler ise enjeksiyon öncesinde protein çöküşüne ihtiyaç duyar.ve kromatografik sistem uzun enjeksiyon dizilimleri boyunca matris birikimi serbest kalmak zorundaydı.

Rejanlar arasında bir kafein referans standardı, HPLC sınıfı metanol, magnezyum oksit, trichloroacetic asit çözeltisi ve ultra saf su vardı.

• Kaynak çözeltisi (2.0 mg/ml):20 mg kafein standardı, 0,1 mg ağırlığında, metanolda çözülmüş ve 10 ml'ye kadar hazırlanmıştır; 4 ° C' de altı aylık bir raf ömrü ile saklanır.
• Ara çözeltisi (200 ug/ml):5Suyla 50 ml'ye kadar seyreltilmiş 0.0 mL stok; 4 °C'de bir aylık raf ömrü ile saklanır.
• Kalibrasyon çalışma çözümleri:0.5, 1.0, 2.0, 5. 0 ve 10. 0 ml ara çözeltinin 10 ml' ye kadar seyreltilmesi, 10.0- 20 dolar.0- 40 yaşında.0, 100 ve 200 ug/ml; analiz gününde taze olarak hazırlanmıştır.

Kola tipi içecek:Örneği 5 dakika boyunca 40 derece C'de bir ultrasonik banyoda degase edin. 5 g ağırlıklandırın (0,001 g'ye kadar doğru), kafein konsantrasyonunun kalibrasyon aralığı içinde olması için 5 ml'ye kadar suyla seyreltin.İyice sallayın., 0,5 g magnezyum oksit ekleyin, tekrar sallayın ve yerleşmesine izin verin.

Süt içeren kahve ve çay içecekleri:1 g ağırlığında (doğru 0.001 g), 10 ml'ye kadar trikloroasetik asit çözeltisi ile seyreltilsin, iyice salınır ve proteinlerin düşmesi için durdurulsun, daha sonra 0,45 um bir zarı üzerinden süpernatantı filtreleyin.

Zirve şekilleri simetrikti ve teorik plaka sayısı yüksekti.Magnezyum oksit temizlemesinin ve trichloroacetic asit protein çöküntüsünün matris bileşenlerini etkili bir şekilde ortadan kaldırdığını doğrulayanAltı ardışık enjeksiyon, mükemmel bir enstrüman hassasiyeti gösteren istikrarlı bir tutma süresi ve zirve alanı verdi.Her iki matrisde de% 94'ün üzerindeki geri kazanım, minimum numune kaybı ve sağlam bir hazırlama prosedürü olduğunu kanıtladı..

GB 5009.139-2014'e göre, diyot dizisi algısı ile Wanyi LC3500 HPLC sistemi, içeceklerdeki kafein belirlenmesi için tamamen onaylanmış bir iş akışı sağladı. 10.0 ila 200 arasında doğrusallık.R > 0 ile 0 ug/mL.9999, RSD'nin% 0,3'ü altında tekrarlanabilirlik ve% 94'ün üzerindeki geri kazanım, hem karbonatlı hem de süt içeren ürünler için yöntemin doğru, hassas ve yeniden üretilebilir olduğunu doğruluyor.0446 mg/kg ve 0.75 mg/kg sistemin düşük gürültüsünü ve yüksek hassasiyetini gösterir, böylece rutin kalite kontrolü için uygundur.İçecek üretimi ve üçüncü taraf laboratuvarlarında etiket doğrulama ve düzenleme uyumluluğu testleri.

• 272 nm'de diyot dizisi algılama, renkli ve bulanık matrislerde kafeinin seçici, düşük gürültülü miktarlamasını sağlar.
• C18 sütunundaki basit bir metanol ve su hareketli faz, laboratuvarlar arasında yöntem aktarımını hızlı ve ucuz tutar.
• Matris özel temizleme, karbonatlı içecekler için magnezyum oksit ve süt bazlı içecekler için trichloroacetic asit, sütunu korur ve kullanım ömrünü uzatır.
• Istikrarlı tutma süreleri ve simetrik zirveler, yüksek verimlilikli QC laboratuvarlarında yeniden enjeksiyon ve tekrar çalışmalarını azaltır.