WAYEAL LCMS-TQ9200 LCMS/MS Sistemi ile Biber Tozundaki Rodamin B Tayini

Rodamin B (Rose Red B veya Basic Violet 10 olarak da adlandırılır) xanthen kimyasal sınıfına ait sentetik bir temel floresan boya.Bu maddenin kendisi parlak pembe kırmızı bir renk gösterir ve su ve etanol gibi kutup çözücülerinde kolayca çözünür.Başlangıçta, tekstil, baskı ve floresan etiketleme gibi endüstriyel alanlarda yaygın olarak kullanıldı. Düşük maliyeti ve güçlü renk yeteneği nedeniyle,Bazı vicdansız tüccarlar yasadışı olarak boyanmak için gıda ürünlerine ekliyor, çili tozu, Sichuan biber çekirdekleri, et ürünleri ve baharatlar gibi, gıda güvenliğini tehlikeye atan önemli bir kirleticidir.
Rodamin B insan vücudu için zehirli olduğu açıktır.Potansiyel kanserojenik ve mutjenik riskler ortaya çıkarır.Sonuç olarak, birçok ülke tarafından gıdalarda yasaklanan, yiyebilir olmayan bir madde olarak sınıflandırılmıştır.ve çeşitli baharatlarda ve işlenmiş gıdalarda tespit oranı sürekli olarak yüksektir..

Bu başvuru notunda, a liquid chromatography-tandem mass spectrometry (LC-MS/MS) method for the determination of Rhodamine B in food was established using the WAYEAL LCMS-TQ9200 liquid chromatography-tandem mass spectrometry systemBu yöntem, etkili bir şekilde gıda matrisinin müdahalelerini ortadan kaldırırken, hedef analitin verimli ekstraksiyonu, hassas ayrımı ve hassas miktarlamasını sağlar.Gıdalardaki Rodamin B'nin hızlı taraması ve doğru miktarlandırılması için güvenilir teknik destek sunar, böylece gıda güvenliği üzerindeki etkin denetimi kolaylaştırır.

Anahtar kelimeler: Gıda güvenliği, Rodamin B, LCMS/MS

1. Araçlar ve Reaktörler

1.1 Enstrüman konfigürasyonu

Tablo 1 Enstrüman konfigürasyonu listesi

1.2 Rejanlar ve Standartlar Listesi

Tablo 2 Rejanlar ve Standart Liste

1.3 Deney malzemeleri ve yardımcı ekipmanlar

Döner karıştırıcı

Yüksek hızlı santrifüj

Analiz dengesi

Katı faz ekstraksiyon (SPE) koleksiyonu (vakum pompası ile)

Azot buharlaştırıcı

Orbital shaker

2Deneyim Yöntemi

2.1 Çözüm Hazırlama

2.1.1 Suda 0.1% Karınca Asidi: 1 ml karınca asidi 500 ml suya aktarın, iyice karıştırın ve su ile 1000 ml son hacimine ulaştırın.

2.1.2 Acetonitrile'deki 0.1% Formik Asit: 1 ml formik asit 500 ml acetonitrile aktarılır, iyice karıştırılır ve acetonitrile 1000 ml hacme kadar sabitlenir.

2.1.3 Su içindeki %50 Metanol: 500 ml metanolu 1 litrelik hacim ölçümlü bir kolbaya doğru bir şekilde aktarın ve daha sonra hacmine su ile sabitleyin.

2.1.4 Suda %50 Metanol ve %0,1 Formik Asit: 1 ml formik asit 500 ml su içinde %50 metanol içine aktarılır, iyice karıştırılır ve %50 metanol su içinde 1000 ml hacme kadar seyreltilir.

2.1Metanol içindeki %5 Amonyak: 5 ml amonyak çözeltisini 100 ml hacim ölçümlü bir kolbaya aktarın, metanol ile hacimine kadar seyreltin ve iyice karıştırın.

2.2 Örnek ön işleme

2.2.1 Örnek çıkarma

Çili tozu örneğinin 1 gramını 50 ml plastik bir santrifüj tüpüne doğru bir şekilde tartın. % 0.1 karınca asidi içeren % 50 metanol sulu çözeltinin 10.0 ml'ünü doğru bir şekilde ekleyin ve iyice karıştırın.İki seramik homogenizer ekleyin., sonra 15 dakika boyunca bir girdap karıştırıcısında girdap. 8000 r/min'de 10 dakika boyunca santrifüj. 3 ml'lik süpernatant (ekstrakt tabakası) aktarın ve 0.Temizlenmeden önce 45μm organik fazlı filtre zarı.

2.2.2 Örnek Temizlenmesi

NovaPre MCX Solid Phase Extraction (SPE) Patronun Kondisyonlandırılması: Kullanmadan önce, 3 ml metanol ve 3 mL su ile sırayla patron aktif hale getirilsin.

Ekstraktın 1.0 ml' sini NovaPre MCX katı fazlı ekstraksiyon (SPE) kartuşuna doğru bir şekilde aktarın.ve 3 ml metanol. Hedef analiti metanol çözeltisinde 6 ml amonyak ile elüte edin ve elüateyi toplayın. Elüateyi 45 °C'de bir azot akımı altında neredeyse kuru duruma kadar buharlaştırın. Geri kalanı 0'da çözün.Başlangıç mobil aşamasının 5 ml., 0,22μm organik fazlı bir filtre zarından filtreler ve daha sonra enstrümantal analiz için filtrat enjekte edilir.

2.3 Deney koşulları

2.3.1 HPLC koşulları

Kromatografik sütun: C18, 1,7μm, 2.1*50mm;
Hareketli aşama: A aşaması: suda % 0,1 karınca asidi; B aşaması: asetonitrilde % 0,1 karınca asidi;
Akış hızı: 0,4 mL/dakika;
Sütun sıcaklığı: 40 °C;
Enjeksiyon hacmi: 1μL.

2.3.2 Kütle Spektrometri Şartları

Tablo 3 Bileşik Kütle Spektrometri Parametreleri

Not: * Ölçücü iyon.

3Deneyin sonucu.

3.1 Standart Kromatogram

Rodamin B'nin tespiti 7 dakika içinde tamamlandı. Şekil 1'de gösterildiği gibi, bileşik zirve iyi bir zirve şekli ve tatmin edici bir yanıt gösterdi.deneysel belirleme için gereklilikleri karşılayan.

Şekil 1 Rodamin B kromatogramı

3.2 Doğrusal Aralık

Standart eğriyi hazırlamak için uygun miktarda Rodamin B standart çalışma çözeltisi doğru bir şekilde aktarıldı ve başlangıçta hareketli fazla seyreltildi.Doğrusal sonuçlar ile bilinen konsantrasyonlar arasındaki sapma maksimum izin verilen sapma sınırları içindeydi.Belirleme katsayısı (R2) 0'dan büyüktü.999, iyi bir doğrusallığı gösterir.

Şekil 2 Rodamin B Standart Eğri

3.3 Ölçümsellik sınırı ve tespit sınırı

Bu yöntemde, Rodamin B için algılama sınırı (LOD) ve miktarlama sınırı (LOQ) sırasıyla 0,1 ng/mL ve 0,5 ng/mL olarak belirlendi.Buna karşılık gelen sinyal-gürültü (S/N) oranları aşağıdaki tabloda özetlenmiştir.LOD'daki S/N oranları 3'ü, LOQ'daki oranlar ise 10'u aştı.

Tablo 4 Kvantitasyon sınırı ve tespit sınırı

Şekil 3 Rodamin B için LOD'de sinyal-gürültü oranı (0,1 ng/mL)

Şekil 4 Rodamin B için LOQ'daki sinyal-gürültü oranı (0,5 ng/mL)

3.4 Tekrarlanabilirlik

Standart çözeltiler üç konsantrasyonda (0.5, 2 ve 5ng/mL) altı kez ardı ardına enjekte edildi. Sonuçlar aşağıdaki tablodadır.orta, ve yüksek konsantrasyonların hepsi deneysel gereksinimleri karşılayan% 5'in içindeydi.

Tablo 5. Düşük, orta ve yüksek konsantrasyonlarda Rhodamine B için tekrarlanabilirlik testi

Şekil 5 6 ardışık enjeksiyonun kromatogramları 0.5ng/ml Rhodamine B

Şekil 6 2ng/ml Rhodamine B'nin 6 ardışık enjeksiyonunun kromatogramları

Şekil 7 5ng/ml Rhodamine B'nin 6 ardışık enjeksiyonunun kromatogramları

3.5 Spike Recovery

Rodamin B konsantrasyonunu 2 ng/mL artırmak için A örneği standart bir çözeltme ile karıştırıldı. Daha sonra altı tekrarlı enjeksiyon analiz edildi.Metot kabul kriterlerini karşılayan.

3.6 Taşıma

10 ng/ml standart çözeltinin enjekte edilmesinden sonra, taşıma değerlendirmesi için boş bir çözücü enjekte edildi.Boşlukta taşınma en düşük kalibrasyon standardının% 10'undan daha azdı (0.1ng/mL), deneysel gereksinimleri karşılar.

Şekil 8 Bileşiğin Boş Kromatogramı

3.7 Örnek testi

Rodamin B konsantrasyonu A örneğinde yöntem tespit sınırının (MDL) altındaydı.

Şekil 9 A örneğindeki Rhodamine B kromatogramı

4Sonuç.

Bu çalışmada, WAYEAL LCMS-TQ9200 sistemini kullanarak Rodamin B'yi belirlemek için sıvı kromatografi-tandem kütle spektrometri (LC-MS/MS) yöntemi oluşturuldu.Alınan veriler, yöntemin iyi simetrisi olan ve kuyruğu olmayan kromatografik zirveleri ürettiğini gösterdi., ve hassasiyet deneysel gereksinimleri karşıladı.999Düşük, orta ve yüksek konsantrasyonlarda tekrarlanabilirlik (RSD) % 5'in içindeydi ve boşlukta taşınma en düşük kalibrasyon standardının % 10'undan azdı..Bu sonuçlar, yöntemin WAYEAL LC-MS/MS sistemi ile birleştirildiğinde, hedef analitikler için rutin nitelikli ve nicel tespit gereksinimlerini karşılayabileceğini göstermektedir.