Wayeal'in LCMS-TQ9200 Sıvı Kromatografi Kütle Spektrometri (LC-MS/MS) Sistemi ile Tavuk Etinde Kinolon Antibiyotik Kalıntılarının Belirlenmesi
China's National Food Safety Standard "GB 31650-2019 Maximum Residue Limits for Veterinary Drugs in Foods" specifies the maximum residue limits (MRLs) of certain quinolone antibiotics in animal-derived food productsEk olarak, "GB 31658.17-2021 Ulusal Gıda Güvenliği Standartı - Tetrasiklinlerin Belirlenmesi, Sulfonamides and Quinolones Residues in Foods of Animal Origin by Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry" specifies the LC-MS/MS analytical method and corresponding limits of quantification (LOQs) for 13 quinolone antibiotics. This application note presents the successfully validated results for the analysis of 13 quinolone antibiotic residues in chicken meat using Wayeal's LCMS-TQ9200 triple quadrupole liquid chromatography-tandem mass spectrometry (LC-MS/MS) system.
Anahtar kelimeler:LC-MS/MS, kinolonlar, veteriner ilaç kalıntıları, gıda güvenliği.
Wayeal LCMS-TQ9200 Sıvı Kromatografi-Tandem Kütle Spektrometri Sistemi
Sıvı kromatografi yöntemi
Kromatografi sütunu: C18 3.0x100mm
Hareketli faz: A: % 0,1 karınca asidi metanolu, B: % 0,1 karınca asidi çözeltisi
Akış hızı: 0.4mL/min
Sütun sıcaklığı: 45°C
Enjeksiyon hacmi: 3μL
Kütle Spektrometri Yöntemi
Tablo 1 Kütle Spektrometri İyon Kaynağı Parametreleri
| İyon Kaynağı |
ESI, pozitif iyon modu |
| İyon Kaynağı Voltajı |
5500V |
| Çözüm gazı akış hızı |
18000mL/dakika |
| Nebulizer gazı akış hızı |
2000mL/dakika |
| Perde gazı akış hızı |
5000 ml/dakika |
| Çarpışma gazı akış hızı |
800μL/dakikada |
| Çözüm sıcaklığı |
450°C |
| Perde gazı sıcaklığı |
150°C |
Tablo 2 Her bir bileşik için kütle spektrometri parametreleri
| Bileşikler |
Q1 |
Q3 |
Gruplandırma potansiyeli (V) |
Çarpışma Enerjisi (V) |
| Oxolinik Asit |
262.1 |
244* |
100 |
25 |
| 160 |
100 |
50 |
| Flumequine |
262.1 |
202 |
115 |
44 |
| 244.1* |
115 |
24 |
| Norfloksasin |
320.1 |
302.1* |
90 |
27 |
| 233.2 |
90 |
33 |
| Enoxacin |
321.2 |
234 |
100 |
38 |
| 303* |
100 |
30 |
| Ciprofloxacin |
332.2 |
231 |
100 |
49 |
| 288 |
100 |
25 |
| Pefloksacin |
334.1 |
316* |
110 |
29 |
| 233.2 |
110 |
35 |
| Lomefloxacin |
352.1 |
265.1* |
110 |
31 |
| 334 |
110 |
29 |
| Danofloxacin |
358.1 |
340.1* |
100 |
32 |
| 283.1 |
100 |
32 |
| Enrofloksacin |
360.2 |
316.1 |
110 |
27 |
| 245.1* |
110 |
38 |
| Ofloksacin |
362.1 |
318.3 |
75 |
25 |
| 261.2* |
75 |
34 |
| Marbofloxacin |
363.2 |
72.1* |
100 |
25 |
| 345.2 |
100 |
29 |
| Sarafloxacin |
386.1 |
299.1* |
110 |
38 |
| 342 |
110 |
27 |
| Difloxacin |
400.2 |
299.1 |
110 |
38 |
| 382.2 |
120 |
30 |
Not: * ile işaretlenen iyon, niceliksel iyondur.
1Deneyin sonucu.
1.1 Zirve şekli
13 kinolon antibiyotik belirlenmesi 11 dakika içinde tamamlandı.Tüm bileşikler, deneysel miktarlandırma gereksinimlerini karşılayan güçlü sinyal yanıtları gösterdi.
Şekil 1 13 Kinolon Antibiyotik Kromatogramı
1.2. Liner Range
2 ila 500 ng/mL'lik konsantrasyonları kapsayan kalibrasyon standartlarını hazırlamak için uygun miktarda kinolon karıştırılmış standart çözeltisi seri olarak seyreltildi.Doğruluk değerlendirmesi, nominal konsantrasyonlarla mükemmel bir uyum gösterdi., tüm sapmaların maksimum izin verilen hatalar dahilinde olduğu belirleme katsayısı (R2) 0,9921 ile 0 arasında değişmektedir.9998, tüm bileşenler için tatmin edici bir doğrusallığı doğruladı.
Tablo 3 Doğrusal Aralık Tablosu
| Bileşikler |
Doğrusal Aralık |
Doğrusal korelasyon katsayısı R2 |
| Oxolinik Asit |
2-500ng/ml |
0.9989 |
| Flumequine |
2-500ng/ml |
0.9988 |
| Norfloksasin |
2-500ng/ml |
0.9968 |
| Enoxacin |
2-500ng/ml |
0.9989 |
| Ciprofloxacin |
2-500ng/ml |
0.9982 |
| Pefloksacin |
2-500ng/ml |
0.9992 |
| Lomefloxacin |
2-500ng/ml |
0.9921 |
| Danofloxacin |
2-500ng/ml |
0.9969 |
| Enrofloksacin |
2-500ng/ml |
0.9998 |
| Ofloksacin |
2-500ng/ml |
0.9941 |
| Marbofloxacin |
2-500ng/ml |
0.9997 |
| Sarafloxacin |
2-500ng/ml |
0.9946 |
| Difloxacin |
2-500ng/ml |
0.9973 |
Şekil 2 Seçilen Kinolon Antibiyotikleri için Doğrusal Aralık Sonuçları
1.3Bulma sınırı (LOD) ve ölçüm sınırı (LOQ)
Ulusal Gıda Güvenliği Standartı GB 31658.17-2021'de, 2μg/kg'lık bir tespit sınırı (MDL) ve 10μg/kg'lık bir miktarlama sınırı (MQL) belirtilir.Tüm hedef bileşikler 2μg/kg'da 3'ten ve 10μg/kg'da 10'dan önemli ölçüde daha fazla sinyal-gürültü oranı göstermiştir., ulusal standartta belirtilen hassasiyet gereksinimlerine tam olarak uygun.
Tablo 4 Hedef bileşiklerin tespit ve ölçüm sınırları için sinyal-gürültü oranları
| Bileşik |
SNR (S/N) |
| 2μg/kg |
10μg/kg |
| Oxolinik Asit |
111.26 |
359.11 |
| Flumequine |
59.64 |
244.73 |
| Norfloksasin |
70.16 |
392.57 |
| Enoxacin |
23.74 |
80.26 |
| Ciprofloxacin |
37.91 |
99.26 |
| Pefloksacin |
28.70 |
125.81 |
| Lomefloxacin |
48.54 |
165.84 |
| Danofloxacin |
105.74 |
348.10 |
| Enrofloksacin |
35.97 |
120.82 |
| Ofloksacin |
51.67 |
287.26 |
| Marbofloxacin |
190.11 |
399.38 |
| Sarafloxacin |
38.11 |
160.79 |
| Difloxacin |
25.85 |
149.29 |
Şekil 3 Seçilen Kinolonlar için LOD/LOQ Kromatogramları
1.4- Kesinlik testi.
Retensyon süresi ve zirve alanı değişimlerini karşılaştırmak için 6 kez üç konsantrasyonda (10, 50 ve 100 ng/ ml) kinolon antibiyotiklerin karışık standart çözeltisi enjekte edildi.Aşağıdaki tablodaki gibi, tüm test edilen kinolon bileşikleri % 0, 3'ten daha az bir retansyon süresi sapması ve % 5'ten daha az bir zirve alanı sapması göstermiştir.RSD ≤15% doğruluk için ulusal standart gereksinimine tamamen uygun.
Tablo 5 Çeşitli bileşiklerin hassas testleri
Şekil 4 Seçilen bileşiklerin hassas kromatogramları
2Sonuç.
Bu yöntemde, tavuk örneklerinde kinolon antibiyotiklerinin belirlenmesi için Wayeal LCMS TQ9200 sıvı kromatografi-tandem kütle spektrometri sistemi kullanılmıştır.Deneysel veriler, tüm analitikler için iyi tanımlanmış zirve şekilleri ve kuyruğun olmaması ile mükemmel kromatografik performans gösterdi., ulusal standartlarda belirtilen duyarlılık gereksinimlerini karşılarken, tüm kalibrasyon eğrilikleri için 0,99'u aşan korelasyon katsayısı (R2) ile iyi bir doğrusallık gösterdi.Bu, 0' dan aşağı tutma süresi sapmaları ile kanıtlanan mükemmel yeniden üretilebilirlik ile birlikte.Üç bağımsız olarak hazırlanmış tavuk örneği partilerinin analizi, kinolon antibiyotiklerinin tespit edilebilir kalıntılarını göstermedi. These results confirm that the analytical method coupled with the Wayeal LC-MS/MS system is fully capable of meeting routine qualitative and quantitative detection requirements for the target analytes in test samples.
Mesajınız 20-3.000 karakter arasında olmalıdır!
