Toprakta 11 Triazin Pesticid Kalanının HPLC ile belirlenmesi

Triazin pestisitler, öncelikle herbisit ve böcek ilacı olarak kullanılan, triazin halkası içeren organik bileşiklerdir. Triazin herbisitlerin çoğu, fotosistem II'deki (PSII) D1 proteinini inhibe ederek, elektron taşıma zincirini bloke ederek ve ATP ile NADPH sentezini engelleyerek, "enerji açlığı" nedeniyle yabani ot ölümüne yol açarak etki gösterir. İndaziflam gibi daha yeni triazin herbisitler, hücre duvarı sentezini engellemek ve bitki büyümesini kısıtlamak için selüloz sentazı hedef alır. Bazı triazin herbisitler cildi ve gözleri tahriş eder; hayvan çalışmaları kanserojen ve teratojenik riskler olduğunu ve uzun süreli maruz kalmanın insan sağlığı açısından risk oluşturabileceğini öne sürüyor. Topraktaki kalıcılıkları nedeniyle bu bileşikler su kütlelerine sızabilir veya akarak su ekosistemleri için risk oluşturabilir.

HJ 1052-2019'a göre numuneler, UV dedektörüyle donatılmış WAYEAL LC3400 serisi HPLC sisteminde analiz edildi. 11 triazin pestisit iyi bir şekilde çözüldü ve tüm çözünürlükler 1,5'u aştı. 25 mg/L standart çözeltinin altı tekrarlı enjeksiyonu, alıkonma süresi için %0,18'in altında ve pik alanı için %0,75'in altında RSD'ler vererek iyi bir cihaz hassasiyeti ortaya koydu. Tüm analitler, test edilen konsantrasyon aralığı boyunca 0,9999'dan büyük korelasyon katsayılarıyla mükemmel doğrusallık gösterdi. Toprak örneklerine 1,0 mg/L eklendiğinde geri kazanımlar %82,16 ile %90,61 arasında değişiyordu, bu da iyi bir doğruluk göstergesiydi. Test edilen toprak örneğinde 11 triazin pestisit kalıntısına rastlanmadı.

Anahtar Kelimeler:triazin pestisitler; Yüksek Performanslı Sıvı Kromatografisi (HPLC); UV tespiti.

1. Aletler ve Reaktifler

1.1HPLC Sistem Yapılandırması

Tablo 1 Cihaz Yapılandırması

1.2 Reaktifler ve Standartlar Listesi

Tablo 2 Reaktifler ve Standartlar

1.3 Kromatografik Koşullar

Tablo 3 HPLC Çalışma Koşulları

1.4 Malzemeler ve Yardımcı Cihazlar

Analitik Denge;

Ultrasonik Temizleyici;

Vorteks Karıştırıcı;

Döner Evaporatör;

2.Deneysel Yöntemler

2.1Reaktif Hazırlama

2.1.111 Triazinli Pestisitlerin Karma Çalışma Standart Çözümü

1.0 mL 11 triazin pestisit standart çözeltisinin (500 mg/L) 5 mL'lik hacimsel bir şişeye aktarılması ve asetonitril ile hacme kadar seyreltilmesiyle karışık bir standart stok çözeltisi hazırlandı. Daha sonra stok solüsyonun asetonitril ile seri seyreltilmesiyle 1.0, 10.0, 25.0, 50.0 ve 100.0 mg/L konsantrasyonlardaki çalışma standardı solüsyonları hazırlandı.

2.2Numune Ön İşlemi

2.2.1Test Örneği Çözümü

Toprak örneğinin 10 gramlık bir kısmı bir Soxhlet ekstraksiyon yüksüğüne aktarıldı ve bu daha sonra ekstraktörün sifon tüpüne yerleştirildi. Numune, saatte 3-4 döngülük bir geri akış hızında 24 saat boyunca 200 mL aseton-diklorometan (1:1, h/h) ile geri akışa tabi tutuldu. Ekstrakt toplandı ve cam yünü (veya cam elyaf filtre membranı) ve susuz sodyum sülfat tabakasıyla kaplı bir cam huniden süzüldü. Ekstraksiyon kabı ve huni, aynı solvent karışımının 2-3 mL'si ile durulandı ve durulamalar, süzüntüyle birleştirildi. Birleştirilen ekstrakt yaklaşık 0.5 mL'ye kadar konsantre edildi, yaklaşık 5 mL n-heksan içerisine alındı ​​ve yaklaşık 1 mL'ye kadar yeniden konsantre edildi.

Konsantre ekstrakt, kartuşun kurumasına izin verilmeden 5 mL aseton ve ardından 10 mL n-heksan ile önceden şartlandırılmış bir katı faz ekstraksiyon (SPE) kartuşuna yüklendi. Kartuş, 3 mL n-heksanla (üç kez) durulandı ve hedef analitler, 10 mL aseton-n-heksanla elüt edildi. Eluat yaklaşık 0.5 mL'ye kadar konsantre edildi, asetonitril içerisinde yeniden oluşturuldu (yaklaşık 0.5 mL'ye kadar) ve son olarak HPLC analizi için asetonitril ile 1.0 mL'ye ayarlandı. Boş ve katkılı numuneler aynı prosedür izlenerek hazırlandı.

3.Deneysel Sonuçlar

3.1Sistem Uygunluğu 

Şekil 1 11 Triazin Pestisit Karma Çalışma Standart Çözeltisinin Kromatogramı

Tablo 4 11 Triazin Pestisitinin Karma Çalışma Standart Çözeltisinin Test Sonuçları

3.2 Hassasiyet

Şekil 2: 11 Triazin Pestisit Karma Çalışma Standart Çözeltisinin (25,0 mg/L) Ardışık Altı Enjeksiyonunun Üst Üste Yerleştirilmiş Kromatogramları

Tablo 5 11 Triazin Pestisit Karma Çalışma Standardı Solüsyonunun (25,0 mg/L) Ardışık Altı Enjeksiyonu için Hassas Test Sonuçları.

Hassasiyet, 25,0 mg/L'de karma çalışma standardı çözeltisinin arka arkaya altı enjeksiyonunun gerçekleştirilmesiyle değerlendirildi. Tutma süresinin RSD değerleri %0,18'in altındaydı ve zirve alanının RSD değerleri %0,75'in altındaydı; bu da cihazın iyi bir hassasiyete sahip olduğunu gösteriyordu.

3.3 Doğrusal Aralık

Şekil 3 Kalibrasyon Eğrisi için Seçilmiş Triazin Pestisitlerin Kromatogramları

Tablo 6 11 Triazin Pestisit için Doğrusallık Testi Sonuçları

Doğrusallık sonuçları: 1,0–100,0 mg/L konsantrasyon aralığında, 11 triazin bileşiği için karışık kalibrasyon eğrilerinin korelasyon katsayılarının tümü 0,9999'dan büyüktü ve tatmin edici doğrusallık gösteriyordu.

3.4 Tespit Sınırı

Şekil 4 0,12 mg/L'de 11 Triazin Pestisitinin Kromatogramı

Tablo 7 0,12 mg/L'de 11 Triazin Pestisitinin Test Sonuçları

Not: Yukarıdaki tabloda yer alan 11 triazin pestisitin (0,12 mg/L) test verilerine göre tespit sınırları, 3 sinyal-gürültü oranına göre hesaplanmıştır. 11 triazin pestisitin teorik LOD değerleri 0,014, 0,026, 0,013, 0,010, 0,013, 0,012, 0,008, Sırasıyla 0,007, 0,008, 0,011 ve 0,013 mg/L.

3.5 Kurtarma

Şekil 5 11 Triazin Pestisitinin Geri Kazanım Testi için Yerleştirilmiş Kromatogramlar

Tablo 8 11 Triazin Pestisitinin Geri Kazanım Testi Sonuçları

Geri kazanım, toprak örneklerine 1,0 mg/L'lik karışık standart çözelti eklenerek ve bunların yukarıda açıklanan prosedüre göre analiz edilmesiyle değerlendirildi. 11 triazin pestisitin geri kazanımları %82,16 ile %90,61 arasında değişmiştir ve bu da tatmin edici bir geri kazanım performansına işaret etmektedir.

3.6 Örnek Analizi

Şekil 6. Toprak Numunesinin Kromatogramı

Toprak numunesinde yukarıdaki 11 triazin pestisitin hiçbir kalıntısına rastlanmamıştır.

4.Sonuç

HJ 1052-2019'a göre, UV dedektörü ile donatılmış WAYEAL LC3400 serisi HPLC sistemi üzerinde toprakta 11 triazin pestisitinin belirlenmesine yönelik bir yöntem kurulmuştur. 11 hedef analit iyi bir şekilde çözümlendi ve tüm çözünürlükler 1,5'u aştı. Cihaz hassasiyeti, 25,0 mg/L standart çözeltinin altı tekrarlı enjeksiyonundan belirlendi; bu, alıkonma süresi için %0,18'in altında ve pik alanı için %0,75'in altında RSD'ler sağladı. Tüm analitler, test edilen konsantrasyon aralığı boyunca 0,9999'dan büyük korelasyon katsayılarıyla mükemmel doğrusallık gösterdi. 1,0 mg/L'lik eklenmiş konsantrasyonda, toprak örneklerinden elde edilen geri kazanımlar %82,16 ile %90,61 arasında değişmektedir. Toprak örneklerinde 11 triazin pestisitin tespit edilebilir kalıntısına rastlanmadı.